青蒿琥酯与美金刚在氯化铝诱导的大鼠神经毒性模型中的作用

摘要：阿尔茨海默病是最常见的神经系统疾病之一，其特征是淀粉样蛋白斑块在多个大脑区域积聚。本研究调查了青蒿琥酯对大鼠铝诱导的神经毒性与美金刚的潜在神经保护作用。将40只雄性白化Wistar大鼠随机分为4组：第1组为阴性对照组，第2组为氯化铵诱导的阳性对照组，第3组为NH 4 Cl + 青蒿琥酯溶液处理组，第4组为NH 4 Cl +处理组美金刚 SC 空间记忆和学习使用莫里斯水迷宫 (MWM) 测试进行评估。在大脑皮层组织匀浆中测量丙二醛 (MDA) 和还原型谷胱甘肽 (GSH) 水平。肿瘤坏死因子-α（TNFα ) 和白细胞介素 1 β (IL-1 β) 使用大鼠酶联免疫吸附测定 (ELISA) 试剂盒测量大鼠大脑皮层组织匀浆中的浓度。在大鼠大脑皮层中测量 Caspase-3、Bcl-2 和 iNOS 基因表达的实时定量逆转录聚合酶链反应 (Real-time qRT-PCR)。通过组织病理学检查研究来自大脑皮层的切片。Artesunate 显着降低大脑皮层 MDA 水平并抑制 iNOS、caspase 和上调 Bcl-2 基因表达。ART 显着增加抗氧化水平 GSH，并显着降低 TNF-α 和 IL-B 水平。它显着降低了 1ry 保留延迟、2ry 保留延迟和初始采集延迟。它还改善了脑组织病理学并减少了淀粉样斑块沉积。

关键词

青蒿琥酯,美金刚,氯化铵,神经 毒性

一、简介

氯化铝 (AlCl 3 ) 诱导的阿尔茨海默病大鼠模型的特点是记忆力减退、乙酰胆碱酯酶过度活跃、氧化应激和淀粉样蛋白 β 蛋白标志物的表达增加。此外，AlCl 3诱导的炎症、半胱天冬酶激活、Tau 病理学改变了大脑皮层中的 Akt/GSK 3β 信号通路 [ 1 ]。接触 AlCl 3会刺激氧化应激标志物并损害肾功能 [ 2 ]。

阿尔茨海默病 (AD) 是一种以认知和行为恶化为特征的神经退行性疾病 [ 3 ]。它不是一种临床前周期长、病程进展的可治愈疾病[ 4 ]。在 AD 中，淀粉样蛋白斑块在海马体和参与思考和决策的大脑皮层区域发展。AD的特征在于β淀粉样蛋白斑块的神经原纤维缠结(NFT)沉积和脑组织中的神经元细胞变性。神经元的氧化应激也与 AD 相关，但其与 NFT 和 β-淀粉样蛋白 (β-AP) 的联系仍不确定 [ 5 ]。

青蒿琥酯是从青蒿中提取的青蒿素的半合成衍生物，在中国传统系统中被认为是治疗发热和寒战的药物[ 6 ][ 7 ]。它是一种安全的抗疟疾药物，具有驱虫、抗病毒、抗微生物、抗氧化、抗炎、抗关节炎和抗癌的特性 [ 8 ] [ 9 ] [ 10 ]。

多项研究证明，青蒿素 (Art) 可有效治疗包括关节炎在内的炎症性关节疾病 [ 11 ]。此外，Art 已被证明可刺激 HepG2 细胞凋亡，这描述了其在细胞生长进程中的重要步骤 [ 12 ]。磷脂酰肌醇 3-激酶/AKT/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白 (PI3K/AKT/mTOR) 信号通路在包括阿尔茨海默病在内的多种炎症性疾病中发挥重要作用 [ 13 ]。PI3K/AKT/mTOR 通路是影响细胞周期调节的细胞内信号通路，因为它与细胞静止、增殖和癌症直接相关 [ 14]。一项重要的研究证明了 Art 通过抑制 PI3K/AKT/mTOR 信号通路来刺激人宫颈癌细胞凋亡的能力 [ 15 ]。

美金刚在实验室研究中证明了 AD 的临床疗效和神经保护作用 [ 16 ]。它的使用改善了痴呆大鼠模型的记忆力减退 [ 17 ]。美金刚的多项研究主要集中在其对神经元的影响 [ 18 ] [ 19 ]。我们试图在这项工作中探索 ART 在氯化铝 (AlCl 3 ) 诱导的阿尔茨海默病大鼠模型中的潜在神经保护作用，并与美金刚作为 AD 的标准药物相比解释其潜在机制。

2. 化学药品

无水氯化铝（分子量：133.332 g/mol）购自 El-Gomhouria Chemical Company，Mansoura，Egypt。研究中使用盐酸美金刚（由丹麦灵北公司制造）、青蒿琥酯溶液（由印度Actiza Pharmaceutical制造）。

3. 实验设计

40 只雄性白化病 Wistar 大鼠（体重 150-160 克）获自埃及曼苏拉大学药学院的动物房。将大鼠饲养在标准笼子中，随意提供食物和水。适应期后，随机分为4组，每组10只。

第1组阴性对照大鼠接受生理盐水。

第 2 组 阳性对照组采用氯化铝（AlCl 3，100 mg/kg bw）腹腔注射6周[ 20 ]。

第 3 组大鼠用上述 AlCl 3 + 青蒿琥酯溶液 (pH = 6.0; 3 mg/kg, ip) 每天一次，持续 6 周 [ 21 ]。

第 4 组大鼠用上述 AlCl 3 + 美金刚 SC (10 mg/kg/天) [ 22 ] 处理 6 周。

3.1。莫里斯水迷宫 (MWM) 测试评估空间记忆和学习

莫里斯水迷宫由一个大圆形水池（其直径为 150 厘米，其高度为 45 厘米）组成，其中充满了 26˚C 至 30 厘米深度的水，并被两条固定的直角线分成四个等效的象限。游泳池被放在一个有照明的测试室里。在每个水池象限中，放置一个圆形平台（其直径为4.5 cm），在采集阶段高于水位1 cm 1 cm，在保留阶段，平台位于水位以下1 cm。在每个阶段的评估过程中，平台位置在同一象限中是恒定的[ 23]。在保留阶段通过添加奶粉使水变得不透明（白色）。在测试过程中，老鼠被训练跳上平台不游泳60秒，到时候老鼠会从游泳池周围的任何起始点学习空间平台点[ 24 ]。

3.2. 迷宫获取阶段

在第 20 天，对大鼠进行四次训练，中间间隔 5 分钟。通过将大鼠引入池壁前面的迷宫进行试验，并记录到跳到平台的延迟时间为 90 秒。如果老鼠在 90 秒内没有跳到平台上，它会被引导到平台上并在那里停留 20 秒。初始采集延迟 (IAL) 定义为大鼠在平台上跳跃所消耗的时间 [ 25 ]。

3.3. 迷宫保留阶段

在四次训练之后，在第 21 天（第 1 次 RL）和第 42 天（第 2 次 RL）计算到达隐藏平台所花费的时间（保留延迟“ RL ” ）。估计 RL 从第 21 天到第 42 天的变化是为了测试获得的记忆。

在保留阶段，将平台从池中移出，每只大鼠放弃 60 秒以寻找丢失平台的位置（4 次试验/天，共 3 天）。从保留阶段数据中提取了几个参数，包括在目标象限中花费的时间、在非目标象限中花费的时间以及通过缺失平台站点的次数 [ 26 ]。

3.4. 脑组织取样和制备

研究结束后，对所有大鼠称重并禁食 24 小时。使用以（Anapental 500 mg/小瓶）形式提供的硫喷妥钠（40 mg/kg，ip of 2.5% thiopental）麻醉大鼠，购自埃及 Sigma Tec Co. [ 27 ]。通过断头处死大鼠，打开颅骨，迅速取出每只大鼠的大脑，并在中间矢状切开成两个半球。

3.5. 各组大鼠大脑半球使用方法如下

用冰冷的盐水清洁一个大脑皮层半球以去除血液，快速保存在 Eppendorf 管中，嵌入液氮中并储存在 -80˚C 用于定量实时聚合酶链反应 (RT-PCR)。另一个大脑皮质半球保存在10%中性缓冲福尔马林中固定，然后通过苏木精和伊红和银染色进行组织病理学检查。

3.6. 生化估计

使用生物诊断试剂盒（埃及）使用大鼠大脑皮层组织匀浆评估丙二醛（MDA）和还原型谷胱甘肽（GSH）水平。此外，使用大鼠酶联免疫吸附测定 (ELISA) 试剂盒（Ray Bio Rat TNF-α 和 IL- 1β ELISA 试剂盒，美国）。

3.7. 组织病理学检查

将大鼠大脑皮层标本置于 10%福尔马林中 24 h 固定并用水清洗。连续的酒精稀释液用于干燥。样品在浸入石蜡中的二甲苯中清洗，在 56°C 的热风烘箱中保持 24 小时。进行石蜡蜂蜡组织块制备以通过切片机以4微米厚进行分割。将得到的组织切片放在载玻片上，从石蜡中清除并用苏木精和伊红染色剂在光学显微镜下进行组织病理学检查 [ 28 ] 和用于老年斑和神经原纤维缠结的银染剂。

3.8. 大鼠大脑皮层中 Caspase-3、Bcl-2 和 iNOS 基因表达测定的实时定量逆转录聚合酶链反应（实时 qRT-PCR）

使用 RNeasy Mini 试剂盒（Qiagen，Valencia，CA，USA）从大脑皮层分离总 RNA。使用 NanoDrop® ND-1000 分光光度计 (NanoDrop Technologies, Wilmington, Delaware, USA) 分别使用 260 和 260/280 nm 的比率通过分光光度法测量每个 RNA 样品的纯度和浓度。计算了每个 RNA 样品的纯度，其范围在 1.8 和 2.1 之间，表明 RNA 的纯度很高。通过实时定量RT-PCR测量mRNA水平。所有 PCR 反应均以 25 µl 的总体积进行，并包含以下成分：来自 25 ng 总 RNA 的 cDNA，每个引物 400 nM（表 1)、无 RNase 水和 12.5 µl SYBR Green PCR Master Mix (ABI)，这是一种优化的缓冲系统，含有 AmpliTaq Gold DNA 聚合酶和 dNTP。所有 PCR 反应均重复进行，循环参数如下：在 95°C 初始变性 10 分钟后，进行 40 个后续循环，其中样品在 95°C 变性 15 秒，然后进行引物退火和延伸在 60°C 下 1 分钟。mRNA的相对量通过GAPDH标准化。使用 2-ΔΔCt 方法计算 mRNA 表达的相对定量 [ 29 ] [ 30]。数据表示为目标 mRNA 的相对量 (RQ)，相对于 GAPDH mRNA 和相对于校准样品进行标准化。正常对照样品用作校准物。其中：ΔCt =（靶基因的 Ct - 参考基因的 Ct），ΔΔCt =（样品的 ΔCt - 对照的 ΔCt，正常，未患病）。Ct 定义为荧光通过固定阈值的分数循环数。

3.9. 统计分析

使用社会科学统计软件包 (SPSS) 程序版本 13 进行统计分析。生化参数数据以平均值±标准差表示。通过单向方差分析检验和事后 Tukey 检验分析实验中各组之间的差异。P 值 < 0.05 值被认为是显着的。

姓名

序列

GAPDH 前锋

5'-CCATCAACGACCCCCTTCATT-3'

GAPDH 反向

5'-CACGACATACTCAGCACCAGC-3'

Caspase-3 前向

5'-GTGGAACTGACGATGATATGGC-3'

Caspase-3 反向

5'-CGCAAAGTGACTGGATGAACC-3'

Bcl-2 前锋

5'-TGTGGATGACTGACTACCTGAACC-3'

Bcl-2 反向

5'-CAGCCAGGAGAAATCAAACAGAGG-3'

iNOS 前进

5'-ACAACGTGGAGAAAACCCCAGGTG-3'

iNOS 反向

5'-ACAGCTCCGGGCATCGAAGACC-3'

表 1。用于定量 RT-PCR 的引物组（Biosearch Technologies，CA，USA）。

4. 结果

在表 2中，两种药物对 iNOS 均有显着抑制作用（分别为 p < 0.006，p < 0.002）。此外，这两种药物都显着改变了 caspase 水平（分别为 p < 0.004、p < 0.002）和 Bcl-2（分别为 p < 0.005、p < 0.002）。

在表 3中，与阳性对照组相比，两种药物都显着降低了 1ry 保留潜伏期、2ry 保留潜伏期和初始获取潜伏期。只有美金刚对物体识别有显着改善。

在表 4中，青蒿琥酯和美金刚均能显着降低 IL-B（分别为 p < 0.002、p < 0.001）。它们还显着降低了 TNF-α（分别为 p < 0.004，p < 0.001）。另一方面，它们显着改善了 GSH（分别为 p < 0.006，p < 0.001）。与阳性对照组相比，青蒿琥酯和美金刚都显着降低了 MDA 水平（p < 0.005，p < 0.001）。

半胱天冬酶 3

iNOS

Bcl-2

第 1 组

0.99 ± 0.33p1

1.01 ± 0.11p1

1.1 ± 0.06p1

第 2 组

2.71±0.51

2.5±0.17

0.48±0.10

第 3 组

1.4 ± 0.36p1,p2

1.5 ± 0.51p1,p2

0.84 ± 0.23p1

第 4 组

1.6 ± 0.45p1,p2

1.9 ± 0.48p1,p2

0.89 ± 0.43p1

表 2。美金刚和青蒿琥酯对氯化铝 (AlCl 3 ) 处理的大鼠大脑皮层中 caspase 3、iNOS 和 BCl-2 mRNA 基因表达的相对定量 (RQ) 的影响(平均值 ± SD)。

P1 显着性与第 2 组；P2 显着性与第 1 组。

初始采集延迟

1ry

保留潜伏期

第二次

保留潜伏期

目的

识别测试

第 1 组

16.9 ± 2.7p1

12.3 ± 7.92p1

8.6±2.01p1

75.7 ± 16.5p1

第 2 组

69.2±22.4

78.2±21.3

53.4±23.7

39.1 ± 13.9

第 3 组

36.2 ± 6.4p1,p2

32.9 ± 8.1p1,p2

35 ± 11.2p1,p2

52.5 ± 12.4p2

第 4 组

27.4 ± 6.5p1

28 ± 11.9p1

23.2 ± 11.4p1

64 ± 9.1p1

表 3。美金刚和青蒿琥酯对氯化铝（AlCl 3）处理大鼠的莫里斯水迷宫（MWM）测试和物体识别测试的空间导航任务中记忆功能的影响（平均值±标准差）。

P1 显着性与第 2 组；P2 显着性与第 1 组。

谷胱甘肽

(毫克/分升)

肿瘤坏死因子-α

(皮克/毫升)

白细胞介素B

(皮克/毫升)

MDA

(纳摩尔/毫升)

第 1 组

14.95 ± 2.7p1

12.12 ± 2.2p1,p2

38.1 ± 5.4p1

9.95 ± 0.96p1

第 2 组

5.9±1.01

23.8±2.7

84.9 ± 10.6

15.7±2.2

第 3 组

12.89 ± 1.34p1

14.5 ± 3.9p1

50.5 ± 6.6p1,p2

11.9 ± 1.1p1,p2

第 4 组

13.11 ± 1.2p1

13.2 ± 2.12p1

46.9 ± 6.2p1

11.33 ± 0.87p1

表 4。美金刚和青蒿琥酯对氯化铝（AlCl 3 ）处理大鼠大脑皮质组织匀浆中GSH、MDA、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）和白细胞介素-1β（IL-1β）浓度的影响（平均值±标准差） .

P1 显着性与第 2 组；P2 显着性与第 1 组。

5. 美金刚或青蒿琥酯对氯化铝 (AlCl 3 ) 处理的大鼠大脑皮层组织病理学检查的影响

图 1和图 2显示了正常的大脑皮层脑组织，没有检测到显微异常。苏木精和伊红对AlCl 3组大脑皮层的检查显示脑细胞凋亡区域（图3和图4）。AlCl 3 + 青蒿琥酯处理组的组织病理学结果显示正常的大脑皮质脑细胞结构和正常的血管厚度，在苏木精和伊红染色的载玻片和银染的载玻片中均未检测到淀粉样蛋白斑块（图5和图6）。AlCl 3的大脑皮层检查+ 美金刚组苏木精和伊红银染显示与AlCl 3组相比，大脑皮层脑组织或多或少正常，脑细胞结构正常，大脑皮层血管厚度正常。在苏木精和伊红染色或银染载玻片中均未检测到淀粉样蛋白斑（图 7和图 8）。

图 1。对照组的苏木精和伊红染色切片（×400）显示正常的大脑皮层脑组织，未检测到显微异常。

图 2。对照组的银染切片（×400）显示正常的大脑皮层脑组织，未检测到显微异常。

图 3。AlCl 3组苏木精伊红染色切片（×400）显示多个凋亡小体（黑色箭头尖端）。

图 4。AlCl 3组银染切片（×400）可见多个凋亡小体。

图 5。AlCl 3 + 青蒿琥酯治疗组的苏木精和伊红染色切片（×400）显示或多或少的正常大脑皮质脑组织，细胞结构正常，血管厚度正常。未检测到淀粉样蛋白斑。

图 6。AlCl 3 + 青蒿琥酯治疗组的银染切片（×400）显示或多或少正常的大脑皮层脑组织，细胞结构正常，血管厚度正常。未检测到淀粉样蛋白斑。

图 7。AlCl 3 + Memantine 组的苏木精和伊红染色切片（×400）显示或多或少的正常大脑皮质脑组织，细胞结构正常，血管厚度正常。未检测到淀粉样蛋白斑。

图 8。AlCl 3 + Memantine 组的银染切片（×400）显示或多或少正常的大脑皮层脑组织，细胞结构正常，血管厚度正常。未检测到淀粉样蛋白斑。

6. 讨论

阿尔茨海默病被认为是全世界最常见的致残性神经系统疾病之一。提出了多种病理过程来解释其机制，并产生了许多药物来对抗疾病和延缓认知功能下降，但结果有限。

我们的研究结果证实，在大鼠中施用氯化铝 (AlCl 3 ) 6 周导致 MWM 证明的空间学习和记忆受损。与对照大鼠相比， AlCl 3处理的大鼠在迷宫获取和保持阶段跳到平台上的时间显着延迟。这些结果与几项研究一致 [ 31 ] [ 32 ] [ 33 ]。氯化铝给药后认知受损可能是由于神经元细胞中 Al 3+的积累引起的 [ 34 ]。

相比之下，美金刚或青蒿琥酯与 AlCl 3共同给予大鼠 6 周显着改善了空间学习和记忆障碍，与 AlCl 3处理的大鼠相比，MWM 测试的第 1 和第 2 RLs 显着下降表明了这一点。几项研究证明，美金刚通过 MWM 测试 [ 35 ] [ 36 ] [ 37 ] 增强了记忆力和认知力。美金刚是一种非竞争性 NMDA 受体拮抗剂，也降低了 AChE 酶活性的升高 [ 38 ]。在目前的研究中，美金刚还显着降低了大脑皮层 TNF-α 和 IL-1β 的浓度。

青蒿琥酯降低了 1ry 保留潜伏期、2ry 保留潜伏期和初始获取潜伏期，改善了认知功能并减少了其延迟。Morris 测试用于认知检查 [ 39 ]。青蒿琥酯的认知增强作用可能是由于其显着降低大脑皮层TNF-α、IL-1β水平所证明的抗炎作用。多项先前的研究证明了青蒿琥酯在不同动物模型中的抗炎作用 [ 40 ]。

目前的研究证明，与对照大鼠相比，在大鼠中施用 AlCl 3 6 周可提高大脑皮层 TNF-α 和 IL-1β 的浓度。这些数据与大鼠 [ 41 ] [ 42 ] 和小鼠 [ 43 ] 的多项研究一致。此外，AD 患者的大脑和血浆中的 TNF-α 和 IL-1β 浓度也增加了 [ 44 ] [ 45 ]。

AlCl 3负责诱导神经炎症和炎性细胞因子产生，例如TNF-α、IL-1β、IL-6，这是由于通过称为反应性小胶质细胞增生的过程在前馈电路中维持小胶质细胞的刺激所致。此外，Al 3+激活核因子-kappa B (NF-κB)、丝裂原活化蛋白激酶/激活蛋白-1 和缺氧诱导因子-1 (HIF-1)，它们负责神经炎症 [ 46 ]。此外，它还能维持小胶质细胞中促炎细胞因子和神经毒素的释放，这会导致神经炎症恶化。氯化铝在大脑皮层中的积累会导致 Aβ 的异常沉积，从而刺激多种炎症成分 [ 47 ]。

目前的研究证明，与 AlCl 3 处理的大鼠相比，在大鼠中单独给予美金刚或青蒿琥酯与 AlCl 3导致大脑皮层 TNF-α、IL-1β 浓度显着降低。几项使用美金刚的研究与我们的研究结果一致 [ 48 ] [ 49 ]。美金刚给药导致大脑皮层 TNF-α 和 IL-1β 浓度降低的解释是由于 NF-κB 通路的抑制和 NMDA 受体的阻断 [ 50 ]。

在炎症性疾病中，ART 被证明有利于抑制 COX-2 基因表达、维持氧化稳态、降低 TNF-α 水平、白细胞介素和抑制 NF-κB 介导的信号通路 [ 51 ]。ART 通过减少大鼠肾小管间质炎症和纤维化具有肾脏保护作用 [ 52 ]。因此，由于其抗炎特性，ART 已通过抑制 Toll 样受体 4 (TLR4)-核用于治疗多种炎症性疾病，如肝纤维化 [ 53 ]、肺纤维化、肾纤维化 [ 54 ] 和硬膜外纤维化因子 (NF)-κB 通路 [ 55]。最后，服用青蒿琥酯 8 天可降低血清 TNF-α 水平并抑制脂多糖 (LPS) 诱导的体内炎症性骨丢失 [ 56 ]。

目前的研究证明，与对照组相比，在大鼠中施用 AlCl 3 6 周可提高大脑皮层 MDA 水平并降低 GSH 水平。氧化应激被定义为活性氧和抗氧化防御之间的不平衡。这种不平衡在多种神经退行性疾病中起着重要作用。多项研究证明，氧化应激是AD的特征性标志。此外，抗氧化系统的抑制刺激了自由基的产生，这些自由基在神经元损伤中占有一席之地 [ 57 ]。在目前的工作中，美金刚和青蒿琥酯均显着增加了大脑皮质中的 GSH 抗氧化水平，并显着降低了 MDA 水平，ART 可以抑制活性氧的生成 [ 40 ]]。丙二醛被认为是脂质过氧化的终产物，会产生细胞毒性，其浓度可以反映细胞损伤的程度。本研究证明青蒿琥酯通过减少脂质过氧化来降低MDA水平。这一发现与 [ 58 ] [ 59 ]的结果一致。上述实验结果也与之前的研究结果一致[ 59 ][ 60 ]，证明青蒿素含有黄酮类物质和具有抗氧化作用和清除自由基能力的多糖类物质，可提高GSH水平[ 61 ]。

阿尔茨海默病通过 Bcl-2、Bax 和 caspase-3 的异常基因表达与细胞凋亡过程有关。Bcl-2 抑制细胞凋亡以保护细胞存活，而不是通过线粒体膜稳定和防止半胱天冬酶和细胞色素 c 释放来促进细胞增殖 [ 62 ]。此外，Bax 抑制 Bcl-2 表达并刺激细胞色素 c 释放，从而激活半胱天冬酶并诱导细胞凋亡过程 [ 63 ]。因此，Bcl-2 和 Bax 对细胞凋亡的调节作用是相反的。

目前的研究结果证实，与对照大鼠相比，在大鼠中连续施用 AlCl 3显着增加了大脑皮层中 caspase 3 的 mRNA 表达、iNOS mRNA 基因的表达。早期的研究已经证明了与增加的 mRNA 表达相似的结果 [ 63 ] [ 64 ] 因为 AlCl 3通过刺激 ROS 的产生引起凋亡性神经元损失，这是神经变性的特征症状 [ 65 ]。它还通过啮齿动物和体外模型中的半胱天冬酶激活来刺激神经元和星形胶质细胞凋亡 [ 64 ]。在β-淀粉样蛋白诱导的阿尔茨海默病和 6-羟基多巴胺诱导的帕金森神经退行性变中已发现半胱天冬酶诱导的细胞凋亡。66 ] [ 67 ]。我们的研究结果与一些研究一致，这些研究解释了在亚硝基二乙胺处理的动物模型中补充青蒿琥酯在 Bcl-2 上调和 Caspase-3 基因表达下调中的作用 [ 68 ]。这证实了青蒿琥酯在减少 AD 中显着增加的细胞凋亡生物标志物方面的神经保护作用，此外它还具有减弱氧化应激标志物的作用。

ART 通过多效机制在保护多个组织方面发挥重要作用。至于胰腺组织 β 细胞，它减少了其细胞凋亡并抑制了 NF-κB、iNOS 表达和 NO 产生的升高 [ 69 ]。此外，ART 后肝星状细胞中 PPAR-γ、p53 和 Caspase 3 的表达显着降低 [ 5 ]。

该研究结果通过对苏木精和伊红和银染色的不同大鼠组的大脑皮层进行组织病理学检查得到证实。与对照组大鼠相比，用苏木精和伊红染色的 AlCl 3处理的大鼠的大脑皮层组织检查显示淀粉样蛋白斑块和退行性变化。类似的早期研究表明，在AD [ 70 ] [ 71 ] 的 AlCl 3模型中淀粉样蛋白斑块的类似结果。

我们的研究与 [ 72 ] 一致，他指出，即使在大脑皮层的单个区域中存在一些缠结，也表明认知能力显着下降，并且与基于临床发现的 AD 诊断相一致。他们补充说，随着认知能力下降的增加，缠结的数量也会增加。此外，Nobakht 等人。[ 70 ] 观察到 AD 的神经病理学诊断标准考虑了 NFT 和老年斑的形成。

与经AlCl 3 处理的大鼠相比，经AlCl 3和美金刚处理的大鼠的大脑皮层组织的组织病理学检查显示或多或少的正常大脑皮层脑组织。此外，未检测到淀粉样蛋白斑。这些结果与几项研究一致，这些研究表明美金刚对淀粉样斑块有降低作用 [ 73 ] [ 74 ]。

在用苏木精和伊红染色或银染色处理的大鼠中对AlCl 3和青蒿琥酯的大脑皮层组织的检查显示与AlCl 3和美金刚共同处理的大鼠相似的结果。不同大鼠组大脑皮层脑组织的组织病理学变化可以通过之前讨论的生化和转录基因表达变化来解释。

7. 结论

ART 对氯化铵神经毒性和包括认知缺陷在内的行为参数具有神经保护作用。通过校正氧化应激和改善大脑皮层神经元细胞中的抗凋亡生物标志物来逆转生化变化。它还改善了病理结构。ART 可以改善这种神经毒性模型中的多种病理缺陷，但需要进一步的临床研究来证实这些结果。

缩写

AD：阿尔茨海默病

Aβ：淀粉样蛋白β

NFT：神经原纤维缠结

AlCl 3 : 氯化铝

MWM：莫里斯水迷宫

IAL：初始采集延迟

RL：保留延迟

ELISA：酶联免疫吸附试验

TNF-α：肿瘤坏死因子α

IL-1β：白细胞介素 1 β

qRT-PCR：定量逆转录聚合酶链反应离子

RQ：相对量化

iNOS：诱导型一氧化氮合酶

利益冲突

作者声明与本文的发表没有利益冲突。

参考

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