医学检验毕业课题设计报告范文
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课 题 题 目
儿童感染性疾病中CRP检测的应用
课题的目的,国内外研究现状和发展趋势(附主要参考文献):
课题的目的:
探讨儿童感染性疾病中C反应蛋白(CRP)检测的临床意义,既有助于感染病原的筛查,达到早查早治的目的,也有助于治疗效果的评价。
国内外研究现状和发展趋势:
从上世纪抗生素出现后,有些人认为感染性疾病不再是儿童主要的疾病,而事实并非如此。国家卫生部免疫规划委员会指出:由于新的感染疾病不断发生,肿瘤等都与感染有关,所以它仍然是儿童的最大 “杀手”。小儿感染性疾病的主要病因是细菌、病毒或其他致病微生物感染引致,特别6-9月是小儿细菌、病毒感染性疾病的高发期,此其间正值夏季,气温高,病毒、细菌繁殖快,小儿到户外活动的频率高、进食的食物种类明显增多,因此特别容易感染细菌、病毒而导致发病。如果小儿反复感染疾病,会引起食欲不振、胃肠功能紊乱,时间长了,会出现铁、锌等微量元素的缺乏,导致营养性缺铁性贫血、锌缺乏等疾病发生,因此而降低免疫力,影响儿童的生长发育。
细菌感染人体,人体为了保护自身而产生炎症机制,临床表现为发热,病理表现为白细胞增多,CRP增加[1]。CRP是一种非特异性急性期炎症反应物[2],是由肝细胞产生[3],99%的正常健康人血清浓度低于1.0mg/dl[4],组织坏死性炎症,是细菌感染和严重组织损伤的一项诊断指标[5],特别是细菌感染后24小时内可上升1000倍。早在80多年前,有两位外国学者发现,一些感染了细菌的病人体内会出现一种变化,即细菌的细胞壁上的C多糖体与病人血清中蛋白质发生肉眼可见的沉淀反应[6]。人体血清中这种蛋白质现被称为CRP[7]。后来经研究证实,CRP聚集在细胞损伤部位[8],选择性沉积于坏死细胞暴露的损伤的膜磷脂上[9];它与裂解细胞释放的游离DNA结合成复合物[10]。尽管尚不明确其主要的特异作用,但已发现CRP对免疫细胞有多种影响[11],并可激活补体[12]。基于上述机制,在临床上,CRP检测主要可归纳为以下两种意义:首先,CRP的检测可以帮助辨别体内是否有炎症[13]。CRP可在各种急性炎症、组织损伤、手术创伤、放射性损伤等发作后数小时内迅速升高,并有成倍增长之势[14]。病变好转时,又迅速降至正常,其升高幅度与感染的程度呈正相关。因此,CRP被认为是人体急性炎症时反应最主要、最敏感的标志物之一[15]。CRP与其他炎症因子如白细胞总数、红细胞沉降率和多形核白细胞等具有相关性,尤其与白细胞总数存在正相关。据报道,对未住院的非特异呼吸道疾病,无明显感染灶的发热和患急性中耳炎的婴儿,CRP增高(≥2mg/dl或滴度≥1:150)对诊断细菌感染比血沉≥30mm/hl要更特异一些。可以说,同时结合CRP值和临床表现,对诊断急性炎症的价值超过血沉和白细胞计数,且CRP可以反映炎症的程度和时间。如果白细胞计数和CRP均在正常范围,则急性炎症的可能性很小。
其次,它可以帮助辨别感染类型。CRP可用于细菌和病毒感染的鉴别诊断[16]:细菌感染时,CRP水平升高;而病毒感染时,CRP不升高或轻度升高,尤其CRP极度升高(超过8.0mg/dl)对细菌性感染更有诊断价值,一项关于154例发热儿童的研究表明,CRP值为2-4mg/dl时,既有细菌又有病毒感染,但CRP大于4mg/dl时,79%为细菌感染,特异性为90%。中耳炎患者CRP>2.0mg/dl时,22%为细菌,6%为非细菌原因。一项关于72例由败血症(73例次)或念珠菌菌血症(3次)的免疫受损病人(主要为白血病)的研究表明,CRP≥2.0mg/dl的占94%;有明显全身病毒感染(主要为脑膜脑炎和肺炎)的72例中77%CRP小于2.0mg/dl。85例次癌症发热患儿中性细胞减少时,细菌感染者CRP≥4.0mg/dl(平均17mg/dl)明显不同于病毒感染或无感染者(平均3mg/dl),敏感性为95%,特异性77%。可见,CRP值可以帮助医生辨别感染的病原微生物类型,有针对性地给予药物和治疗。而且CRP能很快降解(半衰期短于24小时),因此测定血中CRP可以提供治疗是否充分的信息。
总之,近年来的研究显示,CRP直接参与了急性炎症疾病的发生发展,并且是感染性疾病并发症最强有力的预示因子与危险因子。美国的一项调查结果表明,那些有高水平炎症反应的女性(CRP高于3mg/L),死于心肌梗塞和卒中的危险性,比高胆固醇血症者还高两倍。而且CRP高的人即使胆固醇水平不高,所面临的中风和心脏事件的风险也相当高。因此,有专家建议,定期进行CRP的检查,可以及早发现心脏疾病的潜在危险。而本组研究欲证实,对于儿童感染性疾病来说,CRP检测也同样重要,既有助于感染病原的筛查,也有助于治疗效果的评价,故在儿童感染性疾病的临床诊治中,有必要将CRP检测进一步推广应用。
参考文献
葛青,高原.血清前白蛋白和C反应蛋白检测在儿童感染性疾病中的应用[J].上海医学检验杂志,2002.17:29-30.
何建泽.儿童感染性疾病中CRP、ESR变化及意义探讨[J].湘南学院学报(自然科学版),2004,6(3):22-23.
陈孝伟,陈静.80例感染性疾病患儿血清C反应蛋白水平测定及临床应用探讨[J].福建医药杂志,2004,26(6):181-182.
林晓.小儿感染性疾病血清CRP和TRF测定的意义[J].中国实验诊断学,2005,9(1):69-70.金强.C反应蛋白检测在儿童急性感染性疾病中的应用[J].安徽卫生职业技术学院学报,2010,9(1):43-45.
胡玲,张迎梅.血清前白蛋白和C-反应蛋白联合检测临床意义[J].医学伦理与实践,2008,21(6):649-651.
陈丽娟,张效东,白侠.血清前白蛋白与C反应蛋白测定对新生儿感染的诊断意义[J].实用医学杂志,2010,27(8):698-699.
沈春明,梅爱红.细菌性肺炎血清急性时相蛋白检测的临床意义[J].同济大学学报:医学版,2006,27(4):96-97.
张建江,易著文,罗雪梅,等.血清C反应蛋白、α1酸性糖蛋白和前白蛋白的检测在儿童感染性疾病中的应用[J].中国综合临床,2006,22(5):470-471.
沈红红,袁秀丽,陈斌斌.新生儿感染性疾病血清C-反应蛋白和前白蛋白检测意义探讨[J].中国实用医药,2010,5(1):44-45.
程梅,王继贵.高教C-反应蛋白在儿科的应用[J].华东临床检验信息,2003,2(4):125-127.
马勇.白细胞和C反应蛋白在儿童感染性疾病中的诊断价值[J].内蒙古中医药,2011,30(15):111-112.
李文莲,李光贵.血清前白蛋白和C反应蛋白在儿童感染性疾病诊断中的临床意义[J].临床荟萃,2011,26(19):1711-1713.
范艳霞.超敏C反应蛋白 常规C反应蛋白与血常规联合诊断儿童感染性疾病的研究[J].实用医技杂志,2011,18(5):457-458.
芦悦林.C反应蛋白在儿童感染性疾病中的应用价值[J].中国民族民间医药杂志,2009,18(24):66-66.
周宓,潘柏申.C-反应蛋白在临床应用中的进展[J].国外医学:临床生物化学与检验学分册,2005,26(1):73-74.
邓茂雄,凡瞿明,郭晓兰,等.儿童感染性疾病患者血清C反应蛋白和前白蛋白的含量变化及意义[J].医学理论与实践,2003,16(12):1394-1395.
研究内容、实验设计方案、预期结果:
研究内容:
将2010年2月-2011年2月我院收治的102例急性感染患儿设为观察组,其中49例为细菌感染、53例为病毒感染,将同期进行体检的55例正常患儿设为对照组,比较分析各组CRP水平及观察组治疗前后CRP水平。
实验设计方案
1. 资料与方法
1.1 一般资料
将2010年2月-2011年我院收治的102例急性感染患儿设为观察组,其中49例为细菌感染、53例为病毒感染,将同期进行体检的55例正常患儿设为对照组。细菌感染患儿:包括男28例、女21例;年龄为5-9岁,平均年龄为6.1±2.5岁;病毒感染患儿:包括男29例、女24例;年龄为3-8岁,平均年龄为5.9±1.8岁;正常患儿:包括男31例、女24例;年龄为4-9岁,平均年龄为6.2±2.8岁。三组患儿在性别、年龄等方面无统计学差异,具有可比性(P>0.05)。
1.2 方法
1.2.1 试剂与器材
辣根过氧化物酶(HRP);抗体(IgG);0.1mol/L过碘酸钠、乙二醇、4mg/L硼氢化钠、1.0mol/L pH9:5碳酸盐缓冲液、0.01mol/L pH7.2PBS、Sephadex G-25、Sephadex G-200、0.001mol/L pH4.2醋酸盐缓冲液;磁力搅拌器、层析柱、紫外分光光度计等。
1.2.2 实验原理
取2-3ml清晨空腹血,待血块收缩后(2h内)分离血清,采取酶联免疫吸附试验双抗体夹心法测定血清CRP水平。其原理为:先将已知抗原或抗体包被于固相载体的表面,与待检样品中相应抗体或抗原发生反应,再加入酶标记抗体或抗原与免疫复合物结合,最后加入酶的作用底物,根据产物颜色的深浅或测定其A值,可进行定性或定量分析。
1.2.3 操作方法
HRP8.0mg溶于蒸馏水2.0中。加0.1mol/L过碘酸钠0.8ml,22℃轻搅20min。加乙二醇6滴,继续搅拌5min。过Sephadex G-25,用0.001mol/L pH4.2醋酸盐缓冲液平衡,洗脱,分别收集后合并棕色部分,浓缩为2.0ml。在上述溶液中加抗体14.0mg。逐滴加入1.0mol/L pH9.5碳酸盐缓冲液,使pH升至9.0-9.5,室温轻搅2h。加4mg/L硼氢化钠0.2ml,置4℃2h。在0.01mol/L pH7.2 PBS中4℃透析平衡。反应混合物过Sephadex G-200纯化,柱用0.01mol/L pH7.2 PBS平衡和洗脱,流速为15ml/h,分部收集,每管3ml,测定各管的A403nm和A280nm值。将洗脱图形中第一峰合并,分装后贮存于4℃,备用。
1.2.4 结果判断
根据下列公式计算试验结果。酶结合物中HRP浓度(mg/ml)=酶结合物A403nm×0.4;酶结合物中抗体(IgG)量(mg/ml)=(A280nm-A103nm×0.3)×0.62;酶/抗体摩尔比=HRP浓度×4/IgG浓度;该比值在1-2之间者为宜。
1.3 统计学分析
数据采用SPSS统计软件对数据进行分析。两组间比较采用配对资料的t检验;率的比较采用χ2检验。设P<0.05为差异有统计学意义。
预期结果:
1)细菌感染患儿CRP水平显著高于病毒感染患儿及对照组患儿;2)细菌感染患儿CRP水平治疗后较治疗前显著降低,从而进一步验证CRP水平对细菌感染患儿治疗效果评估的应用价值。
所需条件和完成时间:
指导教师意见:
指导教师签名
年 月 日
教研室意见:
教研室主任签名
年 月 日
学院意见:
学院负责人签名
年 月 日