国产植酸酶酵母培养物对兔生长性能、消化和健康的影响

摘要：本研究调查了日粮添加原生植酸酶活性酵母培养物对断奶兔生长性能、植酸降解和血液生化参数的影响。将 56 只兔子（28 只雄性和 28 只雌性）随机分配到 4 组中，其中包含一个对照组和 3 组，每组分别给予酵母Saccharomyces cerevisiae ADR1B1、Hanseniaspora jakobsenii ADR3E1、Hanseniaspora guilliermondiiRD31 在 8 周内。结果表明，与对照组相比，三种酵母菌株的施用加速了兔子的体重增加并改善了兔子的生长性能，但不影响血清生化和血液学参数。在喂食酵母Hanseniaspora jakobsenii ADR3E1的兔子身上观察到最高的体重增加 (1715.95 ± 236 g)、植酸盐降解率 (73.82% ± 0.92%) 和最低的生化参数（甘油三酯、胆固醇、HDL 和 LDL）。这种首次用于动物饲养的本土酵母菌种在兔子育种中提供了最佳的有益效果。因此，基于这一发现，Hanseniaspora jakobsenii可以推荐 ADR3E1 补充兔粮以提高生长性能和盈利能力。

关键词

饲料,生长 性能,本土 酵母,植酸盐 消化,兔

一、简介

在科特迪瓦以及大多数非洲国家，对动物蛋白的需求不断增加。为了解决肉类生产日益短缺的问题，[ 1 ] 建议使用兔子等小型物种作为解决方案，据报道，这种动物能够改善肉类供应和粮食安全 [ 2 ]。事实上，兔的性能受到多种因素的青睐，例如体型小、世代间隔短、生长速度快、生产能力高和遗传多样性，这使得这种动物养殖适合作为发展中国家的肉类生产小牲畜[ 3 ]。此外，兔子可以将它们所吃的蛋白质的 20% 转化为可食用的肉类，高于牛肉（8% - 12%）[ 4]。

然而，由于饮食的复杂消化和性质，兔子的均衡喂养是育种和生产计划面临的最重要挑战之一 [ 5 ] [ 6 ]。提高饲料质量和营养有助于提高兔子生产的盈利能力，因为饲料占总生产成本的最大部分。

事实上，兔子是单胃哺乳动物，以草料、谷物种子和复合饲料为食 [ 7 ]。植物和谷物饮食天然含有植酸和多种矿物质（铁、锌、钙、镁……）。植酸以植酸盐的形式天然存在于植物性食品中，作为磷的储存形式 [ 8 ]。然而，它在酸性、中性和碱性 pH 条件下带负电。因此，这种化合物可以与饮食和胃肠道内源性分泌物中的带正电荷分子结合，如消化酶和粘蛋白，从而降低营养物质的消化率并增加内源性营养物质的分泌 [ 9]。事实上，食品成分中存在的植酸可作为抗营养因子，由于有效螯合金属离子如 Ca 2+、Mg 2+、Zn 2+和 Fe 2+，与蛋白质形成复合物，可导致矿物质缺乏，从而影响它们的消化，也抑制一些消化酶，如α-淀粉酶、胰蛋白酶、酸性磷酸酶和酪氨酸酶[ 10]。这导致这些单胃动物的大部分人口出现严重的营养缺乏和真正的营养问题。此外，由于单胃动物的植酸盐缺乏充分降解，这些化合物通过粪便排出，在土壤微生物的作用下降解，释放出土壤中的磷。这种磷进入水体后会导致富营养化。根据现有的各种方法，特别是物理（如煮沸、蒸煮和高压灭菌）和化学（酸水解和离子交换色谱法）去除植酸盐会降低食品的营养价值 [ 11]。因此，使用植酸酶进行酶促水解以减少植酸是可取的，因为它可以改善食品的营养质量。事实上，植酸酶对非反刍动物的食物和饲料有很大的作用，可以制造生物可利用的磷。这清楚地体现了最近的市场趋势，即植酸酶在食品和饲料领域的重要性。

植酸酶广泛分布于植物、微生物和一些动物组织中 [ 12 ] [ 13 ]。先前的研究表明，微生物植酸酶最有希望用于生物技术应用 [ 13 ] [ 14 ]。然而，尽管一些科学报告讨论了由多种微生物产生的植酸酶，但正如 [ 15]。因此，分离能够在胃肠道中有效释放膳食磷酸盐并在食品加工和储存过程中保持稳定的新型植酸酶微生物是一项挑战。

在我们最近对传统自发发酵饮料棕榈酒微生物群落特征的研究中，我们发现这些饮料中的酵母菌会产生酸性磷酸酶 [ 16 ]，其中大部分在对特定底物进行测试后被确定为植酸酶。此外，这些含有酿酒酵母和非酿酒酵母的酵母菌株能够耐受和承受胃肠道运输的恶劣环境，并且在体外测试时具有自聚集、共聚集、疏水性和胆汁盐水解酶活性的功能属性。. 考虑到这些饮料中含有活的微生物成分而没有观察到任何毒性，而且关于用于动物营养的具有益生菌和植酸酶特性的酵母的报道数量有限，我们假设这些饮料中的微生物，特别是产生植酸酶的酵母，可以有助于减少兔子等缺乏植酸酶的生物体内植酸，改善健康状况。

因此，本研究的目的是研究三种产植酸酶酵母对断奶兔品种体内脱植素化和生长性能的影响。此外，还研究了对一些血液生化参数和盲肠挥发性脂肪酸变化的影响。

2。材料和方法

2.1。酵母菌株、动物、管理和实验设计

本研究中应用的所有程序均按照当地实验动物护理委员会执行，并经科特迪瓦南圭阿布罗古阿大学伦理机构委员会批准。该实验于 2021 年 1 月至 2021 年 3 月在位于 Abobo 市的一个私人农场进行，其中有五十六 (56) 只断奶兔（28 只雄性和 28 只雌性），年龄为 35 天，体重为 595 ± 80 克。将年幼的兔子分成四组，每组十四(14)只兔子(3个处理组和1个对照)。然后将四组中的每一组随机分成7只动物的亚组以重复进行实验。每个兔子亚组都在 1.40 m 2的通风良好的笼子中饲养（0.7 m 宽和 2.0 m 长），配备镀锌钢进料斗和饮水器。每只兔子由 1 到 56 之间的数字标识，连续提供淡水，每天早上 8 点和下午 5 点以标准颗粒饲料喂食。每天定期对笼子进行清洁和消毒。在 90 天的实验期间，没有给兔子服用任何药物。

对照组的兔子喂食从科特迪瓦公司（IVOGRAIN）获得的常规饲料，其组成如表1所示。对于三个治疗组，兔子喂食常规饮食，然后每组在一小时后口服1 ml含有约5×10 8 CFU/ml益生菌酵母菌株的生理溶液。测试了三种益生菌酵母菌株，即酿酒酵母ADR1B1、Hanseniaspora jakobsenii ADR3E1 和Hanseniaspora guilliermondii RD3 1，如表 2所示。这些从棕榈酒中分离出来的菌株 [ 16] 在南吉阿布罗古阿大学（科特迪瓦）生物技术和食品微生物学实验室的培养物收藏中。

2.2. 数据收集和测量

每周单独记录每只兔子的活重，并在整个期间计算体重增加。在喂食之前，在清晨进行称重。到饲养试验的最后一周，随机选择每种处理的 4 只兔子和对照的 4 只兔子，单独饲养在笼子中，并在相同的条件下饲养。在实验结束时（12 周龄），从每个笼子收集粪便（不含饲料颗粒和其他污染物），按照 [ 17 ]的方法提取后，使用分光光度计在 490 nm 处测定未消化的植酸盐.

将兔子禁食约 6 小时，然后从颈部收集不同颜色的盖管中的静脉血，用于测定血液学和生化血清参数。

代码

物种

入藏号

隔离源

ADR1B1

酿酒酵母

MG833312

酒椰酒

ADR3E1

汉森氏菌

MG833303

酒椰酒

RD3 1

Hanseniasporaguilliermondii

CLIB 3085

罗恩酒

表 1。本研究中测试的酵母菌株列表，其登录号和分离来源。

成分股

数量

代谢能

0大卡/公斤

粗蛋白质 （％）

15

垫。粗脂肪 (%)

3.54

粗灰分 (%)

7.94

粗纤维素 (%)

14.57

钙（克/公斤）

10.73

总磷 (g/kg)

6.5

钠 (%)

0.5

维生素A

9000 用户界面/公斤

维生素 D3

1800 用户界面/公斤

维生素E

1800 用户界面/公斤

表 2。用于喂养兔子的常规饮食的组成。

进行了血液学分析 [红色和白色小球的数量、血红蛋白 (Hb) 和红细胞比容 (HCT) 水平、平均红细胞体积 (MCV) 平均红细胞血红蛋白 (MCH)、平均红细胞血红蛋白浓度 (MCHC) 和淋巴细胞数]根据制造商的说明手册使用自动血液分析仪（Sysmex KX-21，加拿大）和针对不同血液学参数的特定标准测定试剂盒。

关于血清生化参数，使用带有反应条的血糖仪（One Touche Ultra）[ 18 ] 测定血糖水平，使用胆固醇试剂盒 [ 19 ] 按照酶促甘油三酯比色法（磷酸甘油氧化酶）测定甘油三酯和胆固醇]，HDL（高密度脂蛋白）胆固醇是在沉淀后使用与氯化镁相关的磷钨试剂进行的，而 LDL（低密度脂蛋白）胆固醇是按照 Friedewald 公式 [ 20 ] 扣除的。总蛋白按[ 21 ]所述方法测定，血清天冬氨酸氨基转移酶（ASAT）和丙氨酸氨基转移酶（ALAT）按[22 ]、[ 19 ]的尿素和[ 23 ]的方法的血肌酐。

采血后，用锋利的刀割断脖子宰杀兔子。使用带有双柱的气相色谱仪（Shimadzu 20 A），在 VFA 提取后配备两个火焰离子化检测器，将屠体取出并收集盲肠内容物用于挥发性脂肪酸 (VFA) 测定，主要是丙酸和丁酸。每种挥发性化合物的浓度由根据方法 [ 24 ]使用标准溶液建立的回归线确定。

2.3. 统计分析

半定量值表示为平均值±标准偏差。使用 R 软件 (R 3.6.1) 进行单向方差分析，然后进行 Tukey-Kramer (HSD) 检验以确定平均值之间 p 值 < 0.05 的差异。（R 3.6.1，2019）与 agricolae 包。多变量分析，特别是主成分分析 (PCA) 是使用 R 软件使用 factoextra 库进行的，以评估各组治疗兔与对照组之间的差异。

3. 结果

3.1。成长表现

原生植酸酶生产酵母对兔生长的施用效果见图1。一般而言，无论是仅喂食常规饲料还是与本地酵母菌株组合饲喂，从实验开始到结束都观察到兔子的逐渐生长（图1（一个））。然而，这种生长在接受酵母菌株的兔子中更为突出，特别是 ADR3E1 和 RD31，从第 5 周开始，它们的生长与其他的显着不同。实验结束时，对照组和ADR1B1、RD31、ADR3E1菌株处理组的动物总重分别为1927.7、2097.3、2248.9和2300.2 g。结果，酵母喂养的兔子每周平均体重增加稳步增加。在对照组兔子中情况并非如此。喂食 ADR3E1 和 RD31 菌株的兔子组在实验结束时获得的最高平均体重增加分别为 262.88 ± 34.04 和 223.26 ± 20.06 g，在第 6 周喂食 ADR1B1 菌株的组分别为 202.99 ± 41.42 g 和 179.69 ± 18。图 1 (b))。从图 1 (c)中可以看出，每周体重增加的 ANOVA 成对比较显示不同测试兔子组之间存在显着差异。事实上，所有处理过的兔子组的体重增加都高于对照组，其中 ADR3E1 菌株对兔子的生长性能影响最大。这种产生植酸酶的酵母菌株在提高生长性能方面也优于其他菌株。

(a)(b)(c)

图 1。施用产植酸酶酵母的本地菌株对兔生长性能的影响。(a) 每周体重增加；(b) 生长曲线，(c) 箱线图显示了四组兔子的不同体重增加。通过 Tukey-Kramer 诚实显着性差异 (HSD) 检验计算差异的显着性，并表示为 *p < 0.05 和 ***p < 0.001。

3.2. 血清生化参数

血清生化参数的平均值，特别是血糖、甘油三酯、总胆固醇、高密度脂蛋白胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇、总蛋白、肌酐和尿毒症，在用产生本地植酸酶的酵母喂养的各个兔子组八 (8) 周后获得在表 3. 葡萄糖的值范围为 1.12 ± 0.16 和 1.36 ± 0.23 g/l，甘油三酯的值范围为 0.33 ± 0.13 和 0.72 ± 0.41 g/l，总胆固醇的值范围为 0.42 ± 0.25 和 0.53 ± 0.28 g/l，0.30 ± 0.09 和HDL（高密度脂蛋白）为 0.36 ± 0.08 g/l，LDL（低密度脂蛋白）为 0.17 ± 0.11 和 0.32 ± 0.06 g/l，总蛋白为 44.36 ± 8.25 和 48.62 ± 8.48 g/l，11.48 ± 0.65 和肌酐为 15.08 ± 3.36 mg/l，ASAT 为 0.18 ± 0.04 和 0.25 ± 0.05 g/l 关于血清酶活性，转氨酶的平均值在 41.60 ± 6.11 IU/l 和 63.20 ± 20.32 IU/l 之间ALAT 为 67.20 ± 11.71 和 77.80 ± 24.50 IU/l。用酵母菌株 ADRE3E1 补充饮食似乎略微降低了这些参数的值，但与其他兔子组的差异没有统计学意义。

3.3. 血液学参数

不同饲喂组兔红细胞、血红蛋白、血细胞比容的平均值分别在（5.65±0.51）×10 6 /mm 3和（5.91±0.47）×10 6 /mm 3、11.00±0.28 g/之间。 dl 和 11.75 ± 0.21 g/dl 和 36.80% ± 1.13% 和 38.35% ± 1.63%（表 4）。未观察到显着差异

参数

兔子组

标准*

控制

ADR3E1

ADR1B1

RD31

血糖克/升

1.13 ± 0.14一个

1.12 ± 0.16一个

1.36 ± 0.23一个

1.19 ± 0.21一个

0.75 - 1.4

甘油三酯 g/l

0.72 ± 0.41一个

0.33 ± 0.13一个

0.47 ± 0.26一个

0.63 ± 0.52一个

1.2 - 1.6

胆固醇克/升

0.47 ± 0.14一个

0.42 ± 0.25一个

0.45 ± 0.19一个

0.53 ± 0.28一个

0.1 - 0.8

高密度脂蛋白克/升

0.32 ± 0.14一个

0.30 ± 0.09一个

0.36 ± 0.08一个

0.32 ± 0.02一个

低密度脂蛋白克/升

0.24 ± 0.08一个

0.17 ± 0.21一个

0.17 ± 0.11一个

0.32 ± 0.06一个

总蛋白质 g/l

48.62 ± 8.48一个

44.48 ± 6.56一个

46.08 ± 5.73一个

44.36 ± 8.25一个

50 - 75

尿素克/升

0.21 ± 0.04抗体

0.20 ± 0.02ab

0.18 ± 0.04b

0.25 ± 0.05一个

0.5 - 1.5

肌酐毫克/升

15.08 ± 3.36一个

11.48 ± 0.65一个

15.00 ± 1.29一个

14.26 ± 2.25一个

5 - 26

反卫星 (UI/l)

51.20 ± 15.40一个

41.60 ± 6.11一个

63.20 ± 20.32一个

54.60 ± 29.44一个

10 - 98

阿拉特 (UI/l)

72.20 ± 17.92一个

67.20 ± 11.71一个

77.20 ± 18.19一个

77.80 ± 24.50一个

55 - 260

表 3。对照组和实验组兔血清生化指标。

* [ 61 ]；HDL高密度脂蛋白；低密度脂蛋白低密度脂蛋白；ASAT 天冬氨酸氨基转移酶；ALAT 丙氨酸氨基转移酶。

兔子组

参数

控制

ADR3E1

ADR1B1

RD31

标准*

RG/mm3

5.6±0.5×106a

5.8±0.4×106a

5.9±0.5×106a

5.7±0.7×106a

3.8 - 7.9 × 106

WG/mm3

5.3±1.4×103a

7.5±2.5×103a

5.0±0.7×103a

7.4 ± 3.3 × 103a

5 - 13 × 103

血红蛋白 g/dl

11.6 ± 0.3一个

11.7 ± 0.2一个

11.4 ± 0.8一个

11.0 ± 0.28一个

9.4 - 17.4

分血器 ％

37.7 ± 1.5一个

37.9 ± 1.2一个

38.3 ± 1.6一个

36.8 ± 1.13一个

33 - 50

淋巴细胞/mm3

3.5±1.1×103a

3.0±0.4×103a

2.4±0.1×103a

3.8 ± 1.3 × 103a

3 - 9 × 103

MCV 毫米3

66.8 ± 3.2一个

65.9 ± 2.0一个

65.0 ± 2.5一个

64.3 ± 6.3一个

50 - 75

MCH pg/细胞

20.6 ± 1.3一个

20.6 ± 1.3一个

19.3 ± 0.1一个

19.2 ± 2.9一个

18 - 24

母婴健康 %

30.9 ± 0.6一个

31.2 ± 1.0一个

29.7 ± 1.0一个

29.9 ± 1.5一个

27 - 34

表 4。对照组和实验组兔的血液学参数。

* [ 61 ]；RG：红球；WG：白球；MCV：平均红细胞体积，MCH：平均红细胞血红蛋白；MCHC：平均红细胞血红蛋白浓度。

关于给予兔子组的益生菌菌株的类型。然而，在接受ADR1B1菌株的兔中观察到最高浓度的红细胞（5.91±0.47）×10 6 /mm 3 ）和血细胞比容（38.35%±1.63%）。另一方面，在喂食酵母菌株 ADR3E1 的人中记录到高血红蛋白浓度 (11.75 ± 0.21 g/dl)。此外，在 MCV（平均红细胞体积）、MCH（平均红细胞血红蛋白）和 MCHC（平均红细胞血红蛋白浓度）的对照组和治疗组之间没有观察到平均值差异。然而，数值从 64.35 ± 6.29 到 66.80 ± 3.25 mm 3对于 MCV，从 19.25 ± 2.90 pg/cell 到 MCH 的 20.65 ± 1.34 pg/cell，对于 MCHC 从 29.70% ± 0.99% 到 31.25% ± 1.06%。同样，白细胞和淋巴细胞的含量在治疗兔和对照组之间没有显着差异。它们的浓度范围从（5.30±1.41）×10 3 /mm 3到（7.55±2.47）×10 3 /mm 3，从（2.40±0.14）×10 3 /mm 3到（3.85±1.34）×10 3 /毫米3分别。白细胞最高浓度（7.55±2.47）×10 3 /mm 3在饲喂酵母菌株 ADR3E1 的兔组中观察到，而在饲喂酵母菌株 ADR1B1 的兔组中淋巴细胞含量最高（3.85 ± 1.34）× 10 3 /mm 3。

3.4. Ceacal 挥发性脂肪酸 (VFA) 含量

通过GC对饲喂产植酸酶酵母的兔组和对照组盲肠内容物中的挥发性脂肪酸浓度进行定量，结果见表5。用相同的常规饮食喂养，对于所有组的兔子，挥发性脂肪酸 (VFA) 含量，即丙酸和丁酸，从一组到另一组有显着差异。用酵母菌株 ADR3E1 喂养的兔子中丙酸 (105.74 ± 3.67 mM) 和丁酸 (137.14 ± 8.17 mM) 的平均值最低，而这些 VFA 在用酵母菌株 RD31 喂养的兔子中含量最高。

3.5. 粪便中的植酸盐浓度

表 6显示了实验 8 周后各组兔粪便中残留植酸盐的含量。基础日粮中植酸盐的浓度为 214.64 ± 0.71 µg/ml。处理后，粪便中的植酸盐浓度从 56.06 ± 1.97 µg/ml 到 202.65 ± 1.48 µg/ml 不等。在喂食菌株 ADR3E1 的兔子组中记录到最低浓度 (56.06 ± 1.97 µg/ml)，而在对照组兔子组中测量到最高浓度 (202.65 ± 1.48 µg/ml)。因此，植酸的降解在使用产植酸酶酵母的兔组中最为明显，依次为 ADR3E1 (73.82% ± 0.92%)、RD31 (66.49% ± 0.21%) 和 ADR1B1 (50.75% ± 3.01%)。对照组降低率仅为5.37%±0.69%。

挥发性脂肪酸 (mM)

兔子组

丙酸

丁酸

控制

160.41 ± 5.08b

205.43 ± 12.52一个

ADR3E1

105.74±3.67℃

137.14 ± 8.17b

ADR1B1

156.14 ± 3.59b

213.75 ± 18.81一个

RD31

177.74 ± 8.94一个

202.97 ± 11.52一个

表 5。对照组和实验组兔盲肠物质挥发性脂肪酸含量。

植酸盐含量 (µg/ml)

降解百分比 (%)

传统饮食

214.64 ± 0.71一个

-

兔子组

控制

202.65 ± 1.48一个

5.37±0.69℃

ADR3E1

56.06±1.97℃

73.82 ± 0.92一个

ADR1B1

105.45 ± 6.99b

50.75 ± 3.01b

RD31

71.76±0.44℃

66.49 ± 0.21一个

表 6。常规饮食和治疗后兔粪便中的植酸盐含量。

3.6. 各组受试兔相关特征的多元分析

为了评估从棕榈酒中分离出的三种潜在的益生菌和植酸酶生产酵母之间的差异，在所研究的总体特征中，我们使用 22 个参数作为输入变量进行了主成分分析 (PCA)（图 2）。前两个分量 (PCA) 占总方差的 73.83%。根据负载，PC1（解释了 41.05% 的方差）对一些血液学参数、VFA、总蛋白、HDL、LDL、甘油三酯的贡献较高……第二个主成分（PC2，方差 32.78%）代表生长性能，大部分血清生化参数。特别是，在绘制不同组的兔子测试时形成了三个集群。集群1包括施用ADR3E1菌株的兔子，其表现出高生长性能和植酸盐降解率。第 2 组包括对照组的兔子和喂食酵母菌株 ADR1B1 的兔子，它们的总蛋白、低密度脂蛋白、肌酐、葡萄糖和 ASAT 含量最高。最后，

4。讨论

在过去的三十年里，研究和开发改善畜牧生产、降低生产成本和减轻畜牧生产对环境的负面影响的战略对科学家尤其是微生物学家、营养学家和生物化学家来说至关重要。已经利用抗生素或一些益生元和/或益生菌的饲料补充剂来实现上述目标[ 25]。从历史上看，有益微生物已被人类用于农业和营养。酵母是获得具有益生菌活性产品的重要来源，无论是活菌株还是其细胞壁的衍生物。这些制剂证明了在牲畜中的免疫抑制活性以及胃肠生理学的改善，这有助于改善生产结果 [ 26 ]。在这项研究中，三种本地酵母，即S. cerevisiae ADR1B1、Hanseniapora jakobsenii ADR3E1 和Hanseniapora guillermondiiRD3 1 均从棕榈酒中分离出来，具有植酸酶和益生菌能力，在兔子育种中进行了测试，目的是改善常规饲料消化、生长性能和动物健康。

(一)(二)

图 2。基于生长性能、消化、血清生化和血液学参数的主成分分析显示了本研究中测试的四组兔子之间的差异。

事实上，植酸盐是植物中磷储存的主要形式，主要存在于谷物中，谷物也是动物饲料中使用的主要成分。它们是一种有机形式的磷，被兔子等非反刍动物利用得很少，因为它们的胃肠道中没有足够水平的植酸酶。这种化合物在用作对照的兔子粪便中的高比率证实了这一点，其降解不超过 6%。此前曾有报道称，粪便中未消化的植酸盐会导致富营养化问题 [ 27 ] [ 28 ] [ 29 ]]。与对照相反，观察到处理过的兔子粪便中植酸盐的显着减少，减少率在 50% 和 75% 之间。[ 30 ]以前的研究使用毕赤酵母重组菌株将小麦基混合物和大豆-玉米粉混合物的植酸盐含量分别降低了 65.3% 和 73.1%。因此，除了显着提高磷的生物利用度，从而减少粪便中的磷输出外，产生植酸酶的酵母在蛋白质消化率和蛋白质和氨基酸利用方面是有效的，因为植酸-蛋白质复合物的分解，如 [ 31]。另据报道，添加到饮食中的植酸酶可提高血浆、骨骼和全身中铜、锌、铁、镁、磷、钙、锰和锌等矿物质的生物利用度、吸收和浓度 [ 31 ] [ 32 ] . 因此，通过改善消化和营养吸收，产生植酸酶的酵母将对生长性能和体重增加产生积极影响。这种现象在用棕榈酒本地酵母喂养的兔子身上观察到，与对照相比，兔子的体重显着增加。获得的研究结果证实了 [ 24 ] 研究报告的先前结果]，谁表明用益生元补充兔子饮食可以改善兔子的生长。正如 [ 33 ]所报道的，由于天然益生菌酵母日粮补充剂的生长兔的高性能可能是由于增强了饲料营养物质的消化率和吸收，导致了正合成代谢状态。此外，每周体重增加的分析显示与断奶后第 4 周相比有显着差异，这与 [ 34 ] 的结果一致，表明第 43 天和第 91 天之间兔子的生长得到改善。益生菌对食物利用的积极影响并因此导致增长增加在很大程度上得到证明 [ 35 ] [ 36 ]。

对于被认为是潜在益生菌的生物体，它必须是非侵入性、非致癌性和非致病性的 [ 37]。因此，与对照组相比，对测试的兔子血液进行了分析，以检测施用的本地酵母对动物健康的任何影响。血清生化参数分析，特别是血糖、甘油三酯、总胆固醇、HDL（高密度脂蛋白）、LDL（低密度脂蛋白）、总蛋白、肌酐、ASAT 和 ALAT，显示治疗兔组和对照组之间没有显着差异。因此，益生菌酵母菌株在血清生化参数方面不会对兔子的健康产生负面影响。此外，记录的参数平均值与欧洲标准的比较表明，除甘油三酯浓度外，大多数参数没有差异。的确，这种差异是由于提供给非洲和欧洲兔子的饮食成分的不同。然而，这些结果接近于 [38 ]。根据一些作者的说法，血清生化参数可能在动物身上表现出差异。这种差异与动物（年龄、物种、品系和性别）、环境条件、取样方法和分析方法有关[ 39 ] [ 40 ]。

与血清生化参数一样，所分析的血液学参数在红细胞、血红蛋白和血细胞比容方面没有显着差异，除了喂食H. Jakobseni ADR3E1 的兔子，其血液学参数高于对照。事实上，根据 [ 41 ]，当在兔子的饮食中添加酵母益生菌时，红细胞、血红蛋白和血细胞比容的水平会增加。另一方面，切巴布 [ 42] 研究表明，使用乳酸菌益生菌可降低这些血液参数。这些记录的差异可能与兔子的遗传和生理特征有关，或与益生菌发挥的作用有关，或与质量和数量不平衡的饮食有关。此外，获得的结果与参考的正常值一致。因此，所使用的益生菌菌株不会导致接受治疗的兔子贫血。至于白细胞配方，所获得的结果也表明，与对照组相比，治疗兔的白细胞和淋巴细胞没有差异。在 [ 41]。此外，获得的结果在正常白细胞范围内。因此，获得的值并不表示急性和慢性感染。

饲料的微生物发酵发生在盲肠中，以确保营养供应 [ 43 ] [ 44 ]。发酵产物对兔子很重要，因为产生的 VFA 是宿主的能量来源。VFAs 的生产涵盖了兔子的维持能量需求 [ 45 ] [ 46 ]。与对照组相比，不同组处理兔产生的 VFAs 浓度有显着差异，这一发现与 [ 47 ] 一致。这种变化可以根据 [ 48 ] 与动物年龄、摄入水平和饮食质量有关，特别是快速发酵纤维的浓度 [ 46 ] [49 ]。龚等人。[ 50 ] 观察到饲喂酵母补充饮食的兔子组的总 VFA 产量显着下降，这与饲喂H. jakobseni的兔子获得的结果一致ADR3E1。这种酵母菌株可以促进兔盲肠前肠未消化物质、挥发性脂肪酸、氨氮、维生素和其他营养物质的发酵。因此，酵母菌株 ADR3E1 将促进营养物质在到达盲肠之前在胃中的消化。挥发性脂肪酸能在肠道内迅速吸收，然后可以提供40%的能量维持成年兔，其中丁酸是后肠的直接能量来源，而乙酸在肝脏代谢中产生胆固醇和脂肪代谢，正如[ 51 ]报道的那样。然而，其他研究人员报告了 VFA [ 52 ] [ 53 ] 的增加，这可能与盲肠中可发酵糖的含量低有关。

多变量分析根据所分析的各种参数对本地产植酸酶酵母进行分类，得出三个不同的簇，其中Hanseniaspora jakobsenii ADR3E1 对兔子的生长性能和健康表现出最佳的积极影响。通常，在用作益生菌时更为人所知的酵母菌株属于酵母属、克鲁维酵母属、汉逊酵母属、毕赤酵母属和念珠菌属，在这些属中，有布拉氏酵母菌、酿酒酵母、脆弱克鲁维酵母、乳酸克鲁维酵母、C. . saitoana和C. pintolopesii [ 54 ] [ 55 ] [ 56 ] [ 57]。此外，作为家畜饲料添加剂最突出的酵母是酿酒酵母，因为它富含可消化的蛋白质、维生素（维生素 B6、硫胺素、生物素、核黄素、烟酸和泛酸）、镁和锌。 [ 58 ]。然而，在这项研究中，H. jakobsenii仍然是一种几乎不为人知的酵母，在添加到兔子的饮食中后，它比同源的S. cerevisiae表现出更大的功效。这一发现对于表征该菌株具有极其重要的意义，并且在研究其技术潜力及其在改善动物饮食方面的开发方面具有重要贡献。如果Hanseniaspora属的某些物种，特别是H. osmophila、H. uvarum [ 59 ] 以其益生菌潜力而闻名，但对于H. jakobsenii 物种而言并非如此，其分离和鉴定仍然是最近的 [ 60 ]。事实仍然是，该物种具有值得阐明的巨大潜力。事实上，它在改善兔子的生长性能和健康方面的能力使其成为开发动物食品补充剂的理想选择。

5. 结论

日粮中添加三种棕榈酒原生植酸酶生产酵母（H. jakobsenii、H . guillermondii和S. cerevisiae）可提高兔子的每周增重、生长性能和消化率。血清学数据还显示酵母补充剂不会改变评估的血液参数。根据研究结果，建议在兔子饮食中添加H. jakobsenii，它显示出增强生长性能和健康状况的最佳潜力。

致谢

这项工作得到了国际科学基金会 (IFS) 的资助，资助号为 E/5669-l。

利益冲突

作者声明与本文的发表没有利益冲突。

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